On pourra utiliser le microscope et le bleu de méthylène qui colore la plupart des parties des cellules et permettra donc de les distinguer et les reconnaître. Mettre l'échantillon dans un verre de montre contenant du bleu de méthylène pendant 2min.
La coloration de tissu biologique est souvent nécessaire pour la mise en évidence et l'identification de cellules ou de la structure tissulaire. Certaines colorations sont compatibles avec la vie cellulaire, d'autres nécessitent la fixation des tissus, et parfois la création de coupes histologiques.
La coloration histologique est utilisée pour mettre en évidence des caractéristiques importantes du tissu, ainsi que pour différencier des éléments structurels du tissu par leur couleur ou l'intensité de leur coloration.
Préparations microscopiques pour études ou représentation. Les préparations permanentes sont des préparations finies et conservées avec une durée de conservation de plusieurs années. Les préparations conservées étant destinées à des usages multiples, elles sont idéales pour l'enseignement et l'illustration.
La coloration de Gram est très utilisée en bactériologie médicale, elle permet de colorer les bactéries et de les distinguer par leur aptitude à fixer le violet de gentiane (Gram +) ou la fuschine (Gram -).
Un colorant est une substance utilisée pour apporter une couleur à un objet à teinter. En chimie, un groupement d'atomes dont l'absorption lumineuse cause la couleur s'appelle un chromophore. Un colorant soluble se désigne comme teinture, sinon c'est un pigment.
Diluer le Giemsa immédiatement avant l'utilisation en le diluant au 1/10 (1 volume de Giemsa et 9 volumes d'eau neutre) dans une éprouvette. Verser le contenu dans une boîte de Laveran dès que la lame est prête et mélanger en agitant doucement (le pouvoir du colorant est maximal au moment du mélange).
Un microscope est un instrument scientifique utilisé pour observer des objets trop petits pour être vus à l'œil nu.
Les Observations microscopiques. Etudier la morphologie microbienne, au microscope photonique, c'est rechercher la forme des bactéries et leur mode de groupement.
Ceci est lié au fait que la couleur du bleu de méthylène est déterminée par son état redox: quand il est sous sa forme oxydée, il est bleu, mais sous sa forme réduite, il est incolore.
Du fait de leurs petites tailles (10 à 100 µm), l'observation des cellules nécessite l'utilisation des microscopes. Les méthodes utilisées pour étudier la structure de la cellule sont la microscopie optique (ou photonique) et la microscopie électronique.
Le classement des colorants selon leur structure chimique se fonde sur la nature du chromophore, ce qui amène à distinguer les principales familles suivantes : colorants azoïques, anthraquinoniques, indigoïdes, polyméthiniques, colorants du diphénylméthane et du triphénylméthane, phtalocyanines, colorants nitrés et ...
Ils sont capables d'être accumulés par un compartiment de la cellule qu'on peut ainsi mettre en évidence : le rouge neutre pour les vacuoles, le vert Janus pour les mitochondries et le violet cristal pour le noyau. Le terme de colorant fixateur n'est pas un terme usité.
La coloration Giemsa est réalisée sur des coupes en paraffine. Elle est utilisée pour colorer les cellules sanguines des tissus hématopoïétiques. Elle peut être aussi appliquée sur toutes les coupes de tissus dans lesquels la présence de microorganismes est suspectée.
Le colorant alimentaire, référencé E129 (Allura Red), est un colorant rouge de synthèse. Il appartient à la famille chimique des composés azoïques. En raison de ses potentiels effets néfastes sur la santé, il est interdit dans plusieurs pays européens (Allemagne, le Danemark ou la Suisse).
Utilisation en microbiologie
Cela permet de différencier et de classer les différentes populations de micro-organismes. Par exemple, lorsqu'il y a suspicion d'infection de l'organisme dans une biopsie, on pourra utiliser cette coloration suivie d'une analyse histopathologique pour émettre un diagnostic.
On peut en trouver en droguerie, en pharmacie et en magasin de produits chimiques, mais de plus en plus difficilement.
Elle permet de visualiser facilement les bactéries et de donner des indications sur leurs formes et leurs tailles. Thème : Coloration de Gram, bactéries, paroi bactérienne, frottis, analyses médicales, yogourt. Le colorant utilisé est le violet de gentiane qui colore l'intérieur des bactéries.
Faire une préparation microscopique
L'objet que vous allez observer doit être de petite taille, de faible épaisseur et doit laisser passer la lumière. Si l'élément observé est liquide déposez une goutte de ce liquide au centre de la lame avec la pipette ou le compte-goutte.
La préparation microscopique nécessite le matériel suivant : – lames de verre porte-objets, propres et sèches ; – lamelles de verre couvre-objets, propres et sèches ; (Remarque : les lames et les lamelles, très fragiles, sont à manipuler avec délicatesse.)